في اختبار ELISA ، ماذا تفعل الأجسام المضادة الأولية والأجسام المضادة الثانوية؟

في اختبار ELISA ، ماذا تفعل الأجسام المضادة الأولية والأجسام المضادة الثانوية؟
Anonim

إجابة:

هذا يعتمد على نوع اختبار ELISA.

تفسير:

ELISA = فحص الإنزيم المناعي المرتبط.

هناك أنواع مختلفة من فحوصات ELISA. ما تحتاجه هو:

  • جسم مضاد مع إنزيم مرتبط به
  • مستضد يرتبط به الجسم المضاد
  • الركيزة من الانزيم الذي يسبب رد فعل قابل للقياس

ال خميرة تعلق على الجسم المضاد في كثير من الأحيان HRP (الفوق بيروكسيديز). يمكن أن يتفاعل HRP مع ركائز مختلفة إما أن تغير لونها أو تنبعث منها ضوء ا ، يمكن قياسهما.

الصورة تظهر لمحة عامة عن أنواع مختلفة من المقايسات ELISA. ساوضح كيف تعمل أدناه.

إليسا المباشر

وهي مغلفة لوحة مع مستضد (حج) وأ الأجسام المضادة الأولية مع يضاف الانزيم. عند إضافة الركيزة ، سيحدث التفاعل ويتناسب مع مقدار تفاعلات الجسم المضاد مع مولد الضد.

ELISA غير مباشر

مرة أخرى ، هو المغلفة لوحة مع المستضد و الأجسام المضادة الأولية يربط المستضد. ا الأجسام المضادة الثانية يضاف أن يرتبط أول الأجسام المضادة. يحتوي الجسم المضاد الثاني على الإنزيم الذي يتفاعل مع الركيزة.

ساندويتش إليسا

هنا اثنين أو ثلاثة من الأجسام المضادة. يتم إرفاق الجسم المضاد للقبض على الألواح ويربط المستضد. يتبع ذلك الخطوات نفسها التي تتبعها إما مباشرة (جسم مضاد واحد فقط) أو طريقة غير مباشرة (جسمان مضادان).

إليسا تنافسية

تسمى أحيانا تثبيط ELISA ، هو أكثر تعقيدا قليلا. هي مغلفة لوحة مع مستضد ليتم البحث. ا الأجسام المضادة الأولية مع الانزيم أول حضنت مع عينة مع تركيز غير معروف لنفس المستضد. ثم يضاف هذا إلى اللوحة ، مما يسمح للأجسام المضادة التي لا تزال خالية من التفاعل مع المستضد على اللوحة. بعد غسل مجمعات الأجسام المضادة للمستضدات من العينة يتم إضافة الركيزة.

عندما تحتوي العينة غير المعروفة على الكثير من المستضد ، سيكون هناك أقل من الأجسام المضادة الحرة لربط لوحة = إشارة أقل.