إجابة:
هو استخدام الأجسام المضادة للكشف عن البروتينات التي تم فصلها بواسطة SDS-PAGE ثم نقلها إلى غشاء.
تفسير:
تحتوي الخلايا على مزيج من البروتينات (بآلاف عديدة) ويمكن فصلها بواسطة SDS-PAGE.
ثم يتم نقل البروتينات من SDS-PAGE ، عن طريق استخدام مجال كهربائي ، من الجل إلى الغشاء الذي يصنع عادة نيتروسليلوز أو فلوريد بولي فينيليدين (PVDF).
يتم التحقيق في الغشاء مع الأجسام المضادة الأولية المحددة لبروتين الاهتمام. ثم يتم استخدام الجسم المضاد الثانوي للكشف عن الأجسام المضادة الأولية. سيحتوي الجسم المضاد الثانوي على علامة يمكن الكشف عنها بواسطة تفاعل كيميائي لإعطاء شريط مرئي على الغشاء ، أو إشارة يمكن التقاطها بواسطة كاميرا متخصصة.
إذا لزم الأمر ، يمكنني التوسع في هذه الإجابة بعمق كبير حيث أديت عدة مئات من اللطخات الغربية خلال حياتي المهنية.
ما هي المناعي الغربي لطخة؟
اللطخة الغربية (البروتين المناعي) هي تقنية تحليلية تستخدم على نطاق واسع وتستخدم للكشف عن بروتينات معينة في عينة من تجانس الأنسجة أو استخراجها. العناصر الرئيسية المطلوبة لإنجاز هذه المهمة هي: فصل مخاليط البروتين حسب الحجم باستخدام الرحلان الكهربائي الهلامي. النقل الفعال للبروتينات المنفصلة إلى دعم قوي. الكشف المحدد عن البروتين المستهدف بواسطة الأجسام المضادة المتطابقة تقريب ا. إن قدرة البقع الغربية على إظهار وجود بروتين محدد بوضوح ، سواء من حيث الحجم أو من خلال ربط الجسم المضاد ، يجعلها مناسبة تمام ا لتقييم مستويات تعبير البروتين في الخلايا لرصد الكسور أثناء تنقية البروتين. في كثير من الحالات ، يتم استخدام البقع الغربية في
لماذا يسمى النشاف الغربي بذلك؟
إنها مزحة. كان هناك أسلوب اخترع يسمى "النشاف الجنوبي" - تم نشر هذه الطريقة لأول مرة من قبل عالم الأحياء البريطاني إدوين ساذرن. في الطريقة يتم فصل شظايا الحمض النووي عن طريق الكهربائي ، ونقلها إلى الغشاء ، وهذا الكشف عن وجود تهجين من التحقيق. في الغرب ، يتم فصل البروتينات النشافية بواسطة الكهربائي ، ثم يتم نقلها إلى غشاء ، ويتم الكشف عن وجودها باستخدام الأجسام المضادة. عندما تم اختراع النشاف الغربي ، فقد تقرر استخدام شعار "البوصلة" والذهاب إلى الغرب. تجدر الإشارة إلى أنه يوجد أيض ا تمايل شمالي وتمايل شرقي وتمايل جنوبي غربي.